KB1165 kingmorn 考马斯亮蓝R250 Coomassie Brilliant Blue R250
货号：KB1165
规格：5g
产品描述：
考马斯亮蓝（Coomassie brilliant blue）是两种相似三苯甲烷染料的总称，有G250和R250两种，结构上前者比后者多了2个甲基，命名上“G”为Green 的缩写，因G250的蓝色染料泛浅绿色；命名上“R”为Red的缩写，因R250的蓝色染料呈微红色调；“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是：通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力，考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子（如磺酸基），从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）多用于电泳蛋白的染色，染色灵敏度比氨基黑高5倍，可达0.1 µg蛋白。但是染色背景比较深，需要褪色后才能进行蛋白条带的观察。考马斯亮蓝G250对蛋白胶染色的灵敏度相对较差，最低检测到0.5 µg蛋白。但是因其在三氯乙酸中不溶而以胶体形式存在，选择性的和蛋白质结合形成复合物，染色迅速，着色深的蛋白质条带数秒内可以显现出来，约45 min后着色最深。而且染色背景低，不需要脱色即可进行蛋白条带的观察。因此，非常适合对电泳凝胶蛋白的快速定性分析。
产品性质：
中文别名（Chinese synonym） | 考马斯亮兰R250；酸性蓝83；酸性艳蓝6B；亮蓝R； |
英文别名（English synonym） | Brilliant Blue R; Brilliant Indocyanine 6B; C.I. number 42660; Acid Blue 83; |
CAS号（CAS NO.） | 6104-59-2 |
分子式（Formula） | C45H44N3NaO7S2 |
分子量（Molecular weight） | 825.97 |
外观（Appearance） | 暗红色至深暗红或暗色粉末 |
| 溶解性（Solubility） | 溶于热水（1 mg/mL），乙醇和甲醇 |
使用方法：
1.标准染色步骤（考马斯亮蓝R250）
1） 蛋白电泳凝胶置于50%甲醇，10%醋酸，40%水溶液中固定，水平摇床上低速摇动30 min~过夜。
2）去除固定液，更换0.25%考马斯亮蓝R250染色液（0.25% R250溶于50%甲醇，10%醋酸，40%水溶液）完全覆盖住胶，染色2-4 h。直至胶染成均匀的蓝色。
注意：当胶在染色液内肉眼不可见时，说明染色完成，否则与深色的染色液对比，凝胶区域看起来颜色偏浅。
3）将胶重新放置在5%甲醇，7.5%醋酸，87.5%水溶液中脱色4-24 h。约1-2 h后蛋白条带即可看到，直至背景变透明后脱色才结束。中间可更换2-4次脱色液。
注意：此方法可检测到的蛋白量最低达到0.1 µg蛋白/条带。
4）将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
2.快速染色步骤（考马斯亮蓝R250）
1）蛋白电泳凝胶在25% IPA，10%醋酸的水溶液中固定30-60 min。
2）将胶放置在10%醋酸的水溶液中进行染色，含有60 µg/mL的考马斯亮蓝R250。约30 min后条带显示，让胶继续染色直至达到理想的蛋白条带。在此染色方法中胶的背景染色比较浅，由于使用胶的浓度很低。
3）将胶重新放在10%醋酸溶液中脱色2 h或更长。期间可更换2-4次脱色液。
4）将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
保存方法：室温保存
注意事项：
1）0.25%考马斯亮蓝R250染色液配置的过程中，需要先用甲醇溶解R250粉末后，再加入醋酸和水，一般情况下不需要滤纸除杂。溶液可在4℃存放6个月，若长时间保存出现沉淀，可用滤纸过滤得到澄清液体。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）仅供研究使用； 不用于诊断过程。
王经理