产品简介:
伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料,在水中解离成带负电荷的阴离子,可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合,从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色,与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比,从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。
使用说明:
一. 需要用户自己准备的试剂
1. 固定液:4%多聚甲醛固定液。
2. 分化液(盐酸乙醇分化液或5%的乙酸溶液或0.5%的盐酸乙醇);
3. 如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,和封片剂(如 PVP封片液、 抗荧光淬灭封片液或中性树胶等其它封片剂),及80%乙醇、90%乙醇、无水乙醇;
4. 70%乙醇。
二. 样品处理
a. 对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5-10分钟 → 换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟→无水乙醇5分钟→90%乙醇2分钟→80%乙醇2分钟→70%乙醇2分钟→蒸馏水2分钟。
b. 对于冰冻切片:
固定液固定10分钟以上→蒸馏水2分钟。
c. 对于培养细胞:
固定液固定10分钟以上→蒸馏水洗涤2分钟→换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
三. 伊红染色
对于上述处理好的样品:
伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注:如果用于免疫组化等染色后的复染,可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。
四. 脱水、透明、封片或进行其它染色
a. 脱水、透明、封片:
70%乙醇10秒→80%乙醇10秒→90%乙醇10秒→无水乙醇10秒→二甲苯透明5分钟→换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟→用中性树胶或其它封片剂封片→显微镜下观察,细胞浆呈粉红色或红色。
b. 进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后:
70%乙醇洗涤2次,每次2分钟。
PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。
然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。如果免疫荧光染色效果不佳,可能染料对抗体结合有影响,请单独染色。
注意事项:
1、伊红染液是醇溶性伊红,可与苏木素配合染色。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
常温保存,一年有效。
仅供研究使用。不得用于动物或人类的诊断或治疗。